OpaD와 같은 오파 단백질의 발현은 PMN에 노출된 후 GC 생존에 해롭지만, Opa+ Gc는 월경 주기의 여포 단계 동안 남성 요도 및 여성 자궁 경부로부터 회복된다(25, 26, 52, 62). 이러한 생체 내 관찰은 급성 감염 동안 Opa 단백질의 세균 발현을 위해 PMN 이외의 요인이 선택한다는 것을 나타낸다. 이러한 압력 중 하나는 Gc가 점막 상피의 상피 표면에 부착하고 상피 세포(63)에 의해 내재화되어야 하는 요구사항에서 비롯될 수 있다. Opa 발현은 또한 편광상피 단층의 Gc transcytosis를 용이하게, 박테리아가 상피 영역에 대한 액세스를 얻을 수 있도록 (64). 또 다른 압력은 인간 적응 면역 계통에서 유래할 수 있습니다. Opa+ Gc 단백질은 CD4+ T 세포의 성숙 및 활성화를 방지하고 Th1- 및 Th2 매개 면역을 차단합니다 (65, 66). CEACAM1의 Opa + Gc 약혼은 또한 B 세포 사멸 (67)에 이르게합니다. 또한, 마우스에 있는 연구는 Opa+ Gc는 혈 청 살균 활동및 생식기 기관 분비에 있는 아직 확인되지 않은 요인에 더 저항력이 있다는 것을 보여주었습니다 (50). 따라서, 단계 마다 Opa 단백질 발현 Gc 감염의 과정 동안 필요에 따라 상피 및 면역 세포와의 상호 작용을 미세 조정 수 있습니다. 이 작품은 NIH R00 TW008042 및 R01 AI097312-01A1, 제프리스 메모리얼 트러스트 어워드 J-1017, 버지니아 대학 연구 개발 위원회 종자 상, 버지니아 나노 스타 종자 상 및 버지니아 대학교 기금에 의해 지원되었습니다. 과학 기술 상 우수성 (A.K.C.에). Opaless FA1090 Gc.

(A) 각 오파 유전자의 내부 부분 (상단) HpaI 제한 효소 인식 사이트와 프레임에서 대체 되었다 (H) 오버랩 확장 PCR에 의해, 5′ 와 프라이머를 사용 하 여 5′ (실선) 그리고 3′ (점선) 오파의 끝. 결실 구문(가운데)은 OPA 삭제 된 자손을 생산하기 위해 FA1090 Gc의 염색체로 변형되었습니다. 오파 결실을 가진 1개의 클론이 다음 오파 결실 구조로 변형되었고, 11개의 오파 유전자가 모두 게놈에서 대체될 때까지. (b) 부모로부터의 게놈 DNA, ΔopaBEGK, 및 Opaless Gc는 11개의 오파 유전자 각각을 측면으로 하는 서열에 상동을 설정하는 프라이머 세트를 사용하여 PCR용 템플릿으로 사용하였다. 오파의 손실은 각 프라이머 세트에 대해 더 빠르게 마이그레이션되는 PCR 제품으로 표시됩니다. 로스 준비 및 서양 블로팅. LOS는 데이비스및 골드버그(45)에 의해 기술된 바와 같이 GC로부터 제조되었고, Gc를 제외하고 GCB상에서 하룻밤 성장후 수집되었고, 프로토콜은 단백질성 K 처리 후에 중단되었다. 리세이트는 10~20% 트리스-트리신 그라데이션 겔(Bio-Rad)에 광범위한 프리스테인드 단백질 마커(뉴잉글랜드 바이오랩)로 분리하였다.

겔은 제조사의 프로토콜에 따라 피어스 실버 스테인키트(Fisher)를 이용하여 은염색하거나 폴리비닐리덴 디플루오라이드(PVDF)로 이송하고 3F11 단일클론 항체로 면역블로이싱처리하였으며, 마이클 아피셀라(대학의 대학)로부터 수득하였다. 아이오와), 고추냉이 페록시다아제-결합염소 항마우스 IgM 항체(Southern Biotech)가 뒤따랐다. 3F11은 LOS(18)의 Gc 올리고사카라이드 α 사슬의 말단 N-아세틸락토사민을 인식한다.